苏丹红检测的分子印迹固相萃取方法

《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法》

一、样品提取

准确称取辣椒粉0.5 g于15 mL离心管中，加入5 mL正己烷，涡旋混合1 min，超声5 min，3000 r/min离心5min，取上清液；上述步骤重复提取4次，合并所有上清液，于40 ℃下氮吹浓缩至约4 mL，待净化。

二、SPE 柱净化（苏丹红分子印迹柱，500mg/6ml）

活化：苏丹红固相萃取柱使用前用5 mL正己烷活化。

上样和洗脱：往固相萃取柱中加入待净化液；再加入5 mL正己烷淋洗，弃去流出液，再加5 mL乙酸乙酯进行洗脱，收洗脱液。

重新溶解：洗脱液40℃氮吹近干，1 mL乙腈定容，涡旋1 min，经滤膜过滤供HPLC测试。

三、标准曲线溶液的制备

取适宜浓度的标准液，用正己烷配制成上机浓度分别为0.05ug/ml、0.10 ug/ml、0.20 ug/ml、0.50ug/ml的标点，得到标准曲线。

四、仪器条件

设备：Agilent Technologies 1200Series

色谱柱：C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm)

检测器：DAD检测器

检测波长：478 nm、520nm

流动相：A：乙腈      B：水。

洗脱方式：等度洗脱，A: B=98: 2

柱温：30℃

流速：1 mL/min

进样体积：50 µL

进样时间：20min

五、实验结果

表1 添加浓度0.2μg/ml苏丹红的添加回收结果

                                    图1 正己烷空白溶剂液相色谱图                                                                               图2苏丹红标准品液相色谱图

                                        图3 苏丹红标准曲线