动物性食品中三氮脒残留量的固相萃取方法

《GB31658.18-2022 动物性食品中三氮脒残留量的测定》

一、样品提取

准确称取试样5g(精确至±0.05g)于50 ml离心管中，准确加入0.5%乙酸乙腈溶液10 ml，涡旋1min，振荡10min，10000 r/min离心10min。移取全部上清液，备用。

二、SPE 柱净化（WCX，60mg/3ml）

活化：固相萃取柱使用前用甲醇3ml、水3ml活化。

上样和洗脱：取备样液过柱，弃去流出液。用5%氨水溶液3ml、甲醇3ml淋洗，弃去淋洗液；抽干小柱；用乙酸甲醇溶液（PH=7.0）1ml洗脱，抽干，收集洗脱液。洗脱液过0.22 µm尼龙滤膜，上机测试。

三、标准曲线溶液的制备

取适宜浓度的标准品，用乙酸甲醇溶液（PH=7.0）配制成上机浓度分别为0.1 μg/mL，0.2 μg/ mL，0.5 μg/ mL，1.0μg/ mL，2.0μg/ mL的标点，得到标准曲线。

四、仪器条件

设备：Agilent Technologies 1200Series

色谱柱： C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm)

检测器：紫外检测器

检测波长：370 nm

流动相：A：0.02mol/L甲酸铵溶液（PH=4.0）      B：甲醇

表1 梯度洗脱条件

柱温：30℃     流速：1 mL/min      进样体积：20 µL

五、实验结果

表2 三氮脒加标回收率结果

                               图1 0.5μg/ml三氮脒标准品液相色谱图                                                                           图2添加浓度0.5μg/ml三氮脒液相色谱图                                                                                                       

                                         图3 三氮脒标准曲线