油炸品中丙烯酰胺检测的固相萃取方法

《GB/T 5009.204-2014 食品安全国家标准食品中丙烯酰胺的测定》

一、样品提取

准确称取1.00g（精确到0.01g）剪碎的油条置于50ml离心管中，加入10ml乙腈，振荡提取10min，4000 r/min离心5min，上清液转移至100ml梨形瓶中；再加入10ml乙腈重复提取一次，合并滤液，加4ml水，50℃旋转蒸发至约2ml溶液，备用。

二、SPE 柱净化（HLB 60mg/3ml）

活化：使用前用 3mL甲醇、3 mL水活化。

上样和洗脱：取备用液过柱，加3ml水到梨形瓶清洗一次再全部转移到柱子，收集全部流出液，抽干小柱（整个上样、洗脱过程控制流速在1ml/min内）。

重新定容：流出液加水定容至6ml，经0.22µm滤膜过滤，供上机测定。

三、标准曲线溶液的制备

取适宜浓度的标准品，用水配制成上机浓度分别为0.01ug/ml、0.02 ug/ml、0.05 ug/ml、0.1ug/ml的标点，得到标准曲线。

四、仪器条件

设备：Agilent Technologies 1200Series

色谱柱：C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm)

检测器：DAD检测器

检测波长：210nm

洗脱方式：等度洗脱，水：甲醇=90：10

柱温：室温

流速：1 mL/min

进样体积：20 µL

进样时间：15min

五、实验结果

5.1 加标回收率结果

表1  0.3 mg/kg丙烯酰胺的添加回收结果

5.2 校正曲线及色谱图

                                          图1 0.05μg/ml丙烯酰胺标准品液相色谱图

                                             图2 0.3mg/kg丙烯酰胺液相色谱图

                                          图3 丙烯酰胺标准曲线